肿瘤病理学诊断：细胞遗传学和分子生物学技术

2017-10-05

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细胞遗传学与分子病理学诊断在增加肿瘤诊断准确性、指导肿瘤治疗及预后评估中具有重要意义。

1、核型分析（karyotype analysis）细胞遗传学常用分析方法，用形态学方法研究染色体数目及结构异常，是肿瘤诊断一种辅助方法。需要新鲜组织

2、荧光原位杂交（FISH）用荧光素标记已知DNA探针与组织切片上肿瘤组织杂交，在荧光显微镜下观察，显示与其相应染色体某个区段或整条染色体。适用于染色体易位、缺失和扩增的检测，对肿瘤确诊和治疗有重要意义。新鲜组织/石蜡切片。缺点：荧光易淬灭，不能长期保存。

3、比色原位杂交（CISH）用酶代替荧光检测，在保持肿瘤结构和细胞学特点下分析染色体改变。最常用于基因扩增。

优点：不需要荧光显微镜、照相设备和分析软件，且价格更低廉，组织切片能长期保存。

缺点：敏感性不如FISH法。

4、比较基因组杂交（CGH）将消减杂交、荧光原位杂交相结合，检测DNA序列拷贝数变异并将其定位在染色体上的方法。优点：仅需微量肿瘤细胞DNA，一次实验就可对整个基因组中所有遗传物质异常进行分析。可用新鲜标本、石蜡包埋标本甚至福尔马林固定标本。缺点：对缺失的检出需由其他方法加以证实，对结构重排不能检出。灵敏度和分辨率有待提高。

5、Southern印迹杂交（Southern blot hybridization）是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。在DNA图谱分析及PCR产物分析等方面有重要价值。优点：检测抗原受体基因所有的重排。缺点：操作复杂、费时。

6、聚合酶链反应（PCR）是指在DNA聚合酶催化下，以母链DNA为模板，体外复制出与母链模板DNA互补的子链DNA的过程。如果提取肿瘤细胞中mRNA，经反转录酶作用，合成cDNA，再以此为模板进行聚合酶链反应，称为反转录PCR(RT-PCR)。优点：技术操作简便、快速、敏感性高，已作为常规分子生物学检测方法，广泛应用于肿瘤诊断、治疗及预后判断。

7、生物芯片技术（biochip）：是近年发展起来的高新技术，按生物芯片上样品储存的不同类型信息，可分为：基因芯片：在临床上可用于肿瘤的诊断、筛查及抗肿瘤药物的选择；蛋白质芯片：在临床上可用于肿瘤的诊断、筛查及抗肿瘤药物的选择；组织芯片：是将数十个至数百个小的组织片排列在载体上而成的组织微阵列。是一种高通量、大样本以及快速的分子水平的分析工具。

8、DNA单链构象多态性技术（SSCP）是一种基于单链DNA构象差别来检测点突变方法。广泛用于肿瘤诊断和研究。

9、DNA测序技术（DNA sequencing）能可靠地检测出发生点突变的DNA核苷酸。第二代测序技术通过捕捉新合成的末端标记来确定DNA的序列。比新一代测序平台通量更高、速度更快。可以开展全基因表达图谱分析，临床医师可以通过全基因组图谱，了解肿瘤患者整体遗传信息，对诊断、治疗和用药提供指导性意见。

作者：健康全记录