术后复发转移是肿瘤患者死亡的重要原因，30~55%的早期NSCLC根治性切除后死亡即由于肿瘤复发转移；而标准术后辅助化疗仅能带来5%左右的5年生存获益增幅，因此临床急需高效低毒的术后辅助治疗方案！来自美国约翰霍普金斯大学的一项临床前研究则为表观遗传治疗作为术后辅助治疗，以预防复发转移提供证据！

这是一项2011年的II期临床试验，试验由于中止；入组I期NSCLC患者，随机分组至AET组（辅助表观遗传治疗组：5氮杂胞苷联合恩替诺特）或观察组；结果虽不能说明什么，但也隐约提示AET似乎可以降低术后复发率；

但事实上，表观遗传治疗是否真的可以抑制转移呢？它的机制又是如何？

a: 荷瘤小鼠模型建立（原发灶切除后肺转移模型），一组接受安慰剂，一组接受AET；

b：动态观察肺转移数目及面积；

c：在观察组中，对比不同时间段肺组织免疫细胞比例动态变化；发现CD11b+GR1+细胞肺转移后数目明显升高！这代表的就是MDSCs（骨髓来源抑制细胞）；

d：通过MDSCs特异抗体pep-H6阻断MDSCs后发现小鼠模型转移减少及生存延长！

e： 通过注射转移小鼠模型的MDSCs可促进转移，而且单核MDSCs作用更强！

f：  通过予以低剂量AET（LD-AET）后，可以明显减少MDSCs数量；

a/b：将转移小鼠模型（CD45.1）中单核MDSCs转至CD45.2小鼠中，LD-AET可明显减少该细胞群体数量；

c： 一组对照，一组LD-AET，随后将两组单核MDSCs进行RNA测序，分析差异表达RNA；

d： LD-AET治疗后的单核MDSCs中CCR2表达明显下降；

# CCR2（CC趋化因子受体-2）是单核细胞从骨髓向肿瘤微环境迁移的关键调控分子，这表明LD-AET可能通过下调CCR2来阻碍单核MDSCs向肺的迁移。

e： 通过定量PCR及FACS证实LD-AET治疗后的MDSCs中CCR2表达下调；

f：  LD-AET干预后的骨髓来源MDSCs，即使注射CCL2，其迁移能力也明显减弱；

g： 当比较WT，敲掉CCR2的小鼠模型肺组织中单核MDSCs数目明显减少；同时，敲掉CCR2的小鼠其无肺转移生存率明显延长！证明了CCR2是骨髓来源MDSCs迁移至肺组织协助转移前微环境形成的关键调控因子！

a：将RNA测序数据进行GSEA分析，发现与巨噬细胞分化及活化相关；

b：巨噬细胞分化相关转录因子明显上调；

c：LD-AET干预后，MDSCs细胞群体减少，而巨噬细胞群体明显增加；

d：前200个上调RNA同样提示提示了巨噬细胞群体增加；

e：将肺转移小鼠模型的骨髓来源单核MDSCs（CD45.1）植入CD45.2小鼠中，一组CD45.2接受LD-AET治疗，另一组则是对照；发现接受LD-AET治疗的CD45.2小鼠中，虽然CD45.1来源的单核MDSCs明显减少，但是间质巨噬细胞比例却显著增加！

# 这说明了LD-AET可能使肺转移前微环境中单核MDSCs转化为间质巨噬细胞样表型！

a-e都说明术后辅助LD-AET可明显抑制肺转移，延长小鼠生存！

肿瘤根治性切除术后如何抑制复发转移，延长生存是辅助治疗的根本目的！CTONG1104术后辅助靶向治疗给EGFR突变患者带来了DFS的获益，但OS是阴性结果；辅助免疫治疗概念是否可以如PACIFIC般获得成功？尤其是当切除后，缺乏足够的肿瘤抗原暴露的环境下，免疫治疗的疗效是如何的？虽然这篇临床前研究提示表观遗传治疗可抑制转移，但其作为辅助治疗的探索之路仍然绕远，疗效、安全性以及biomarker也是有待解决的问题！