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    临床病理学检查的基本方法

    2017-04-01

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    1. 大体检查(gross examination)

    主要运用肉眼或辅以放大镜、量尺和磅秤等工具,对大体标本及其病变的特点(形状、大小、重量、色泽、质地、表面及切面形态、与周围组织和器官的关系等)进行细致地检查、描述、记录和取材,必要时可摄影留作资料。


    2. 组织学检查与诊断

    2.1 常规(石蜡切片)病理学检查与诊断:

    将肉眼确定的病变组织取材后,以10%中性福尔马林液固定和石蜡包埋制成切片,苏木素-伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色后光学显微镜观察。通过分析和综合病变特点,做出疾病的病理诊断。必要时辅助组织化学、免疫组化、分子病理学等检查协助诊断。

    2.2 快速冷冻切片病理学检查与诊断:

    是临床手术科室向病理科申请的一种急会诊形式。将肉眼确定的病变组织取材后,直接置于冷冻切片机中的组织托上,然后制成切片,苏木素-伊红(hematoxylin and eosin,HE)快速染色后光学显微镜观察。通过分析和综合病变特点,做出疾病的病理诊断。自收到组织标本之时起一般在30分钟内发出诊断报告。手术中快速冷冻病理学诊断直接影响手术或其他治疗方案的选择。

    适用范围

    需要确定病变性质(如肿瘤或非肿瘤、良性肿瘤或恶性肿瘤),以决定手术方案的标本。

    确定肿瘤部位的手术切缘有无肿瘤组织残留。

    确定送检标本是否有病变存在。

    了解恶性肿瘤的扩散情况,包括肿瘤是否浸润相邻组织、有无区域淋巴结转移等。

    确认切除的组织来源,例如甲状旁腺、输卵管及异位组织。

    慎用范围

    涉及截肢或其他会严重致残的根治性手术切除的标本,需要此类手术治疗的患者,其病变性质宜于手术前通过常规活检确定。

    不宜应用范围

    疑为恶性淋巴溜。

    过小的标本(标本长径≤0.2cm)。

    术前易于进行常规活检者。

    脂肪组织、骨组织和钙化组织。

    需要依据核分裂像计数判断良、恶性的软组织肿瘤。

    主要根据肿瘤生物学行为特征而不能依据组织形态判断良、恶性的肿瘤。

    已知具有传染性的标本(如结核病、病毒性肝炎、爱滋病等)。


    3. 细胞学检查与诊断:

    通过采集病变处的细胞,涂片染色后进行细胞学诊断。包括脱落细胞学(exfoliative cytology)和细针穿刺细胞学(fine needle cytology)两种方法。

    病变处细胞的来源:

    ● 应用各种采集器在女性生殖道、口腔、食管、鼻咽部等病变部位直接采集细胞;

    ● 自然分泌物,如痰液、乳腺溢液、前列腺液;

    ● 体液,如胸腹腔积液、心包积液和脑脊液;

    ● 排泄物:如尿液;

    ● 内规镜刷取的细胞;

    ● 细针直接穿刺病变部位(如甲状腺、乳腺、淋巴结等)所吸取的细胞。细针穿刺(fine needdle aspiration,FNA)

    涂片的方法:手工或机械(膜式或沉淀式液基制片机)

    可用于患者或肿瘤普查,也可为DNA提取等提供标本。

    确定恶性肿瘤后须进一步经活检证实。


    4. 组织化学染色(histochemistry)

    又称特殊染色,通过应用某些能与组织或细胞内的化学成分特异性结合的显色试剂,定位显示病变组织或细胞内特殊化学成分(如蛋白质、酶类、糖类、脂类等),同时又能保存原有的形态结构,达到形态与代谢的结合。


    5. 免疫组化染色(immunohistochemistry,IHC)

    是利用抗原抗体特异性结合的原理来定位组织和细胞中某种抗原的一种特殊组织化学染色方法。达到了形态与功能和代谢变化的结合。

    目前其已广泛应用于临床病理工作中,是不可缺少的辅助诊断技术。

    其结果分析必须密切结合组织形态学特点和临床表现。


    6. 超微病理学检查

    电子显微镜有两种:透射电子显微镜和扫描电子显微镜。

    观察细胞的亚细胞结构或大分子水平的变化。

    应用:肾病穿刺活检标本(肾小球肾炎的分型),确定肿瘤的组织发生、类型和分化程度。


    7. 分子病理学检查(molecular pathology)

    原位核酸分子杂交技术

    荧光原位核酸分子杂交技术

    基因重排技术

    实时定量PCR技术

    DNA测序技术

    基因芯片技术等


    8. 分子遗传学检查(genetic pathology)

    染色体分析技术等


    9. 尸体剖验(autopsy)

    直接观察疾病的病理改变,明确对疾病的诊断,查明死亡原因,帮助临床医师总结经验,提高临床诊治水平,同时为医疗纠纷的正确解决提供了证据;

    及时发现某些传染病、地方病及流行病,为疾病防治提供依据;

    可积累大量人体病理材料,对病理学和临床医学发展均有极其重要的意义。

    荧光原位杂交(FISH)1.jpg

    图1. 荧光原位杂交(FISH)


    作者:LAMP

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